ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ ਸਪਾਈਕ ਪ੍ਰੋਟੀਨ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਪੋਰਸੀਨ ਐਕਿਊਟ ਡਾਇਰੀਆ ਸਿੰਡਰੋਮ ਕੋਰੋਨਾਵਾਇਰਸ ਆਈਜੀਜੀ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਦੀ ਖੋਜ ਲਈ ਅਸਿੱਧੇ ਐਲੀਸਾ ਵਿਧੀ ਦਾ ਵਿਕਾਸ

ਪੋਰਸਾਈਨ ਐਕਿਊਟ ਡਾਇਰੀਆ ਸਿੰਡਰੋਮ ਕੋਰੋਨਾਵਾਇਰਸ (SADS-CoV) ਇੱਕ ਨਵਾਂ ਖੋਜਿਆ ਗਿਆ ਪੋਰਸਾਈਨ ਐਂਟਰਿਕ ਪੈਥੋਜੈਨਿਕ ਕੋਰੋਨਾਵਾਇਰਸ ਹੈ ਜੋ ਨਵਜੰਮੇ ਸੂਰਾਂ ਵਿੱਚ ਪਾਣੀ ਵਾਲੇ ਦਸਤ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸੂਰ ਉਦਯੋਗ ਨੂੰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਆਰਥਿਕ ਨੁਕਸਾਨ ਪਹੁੰਚਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਵਰਤਮਾਨ ਵਿੱਚ, SADS-CoV ਲਾਗ ਅਤੇ ਵੈਕਸੀਨ ਦੀ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ੀਲਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ ਕੋਈ ਢੁਕਵਾਂ ਸੇਰੋਲੌਜੀਕਲ ਤਰੀਕਾ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਇਸਲਈ ਇਸ ਘਾਟ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਐਂਜ਼ਾਈਮ-ਲਿੰਕਡ ਇਮਯੂਨੋਸੋਰਬੈਂਟ ਅਸੇ (ELISA) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਤੁਰੰਤ ਲੋੜ ਹੈ।ਇੱਥੇ, ਮਨੁੱਖੀ IgG Fc ਡੋਮੇਨ ਨਾਲ SADS-CoV ਸਪਾਈਕ (S) ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਪ੍ਰਗਟ ਕਰਨ ਵਾਲਾ ਇੱਕ ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡ ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ ਬੈਕੁਲੋਵਾਇਰਸ ਪੈਦਾ ਕਰਨ ਲਈ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ HEK 293F ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਗਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।S-Fc ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਪ੍ਰੋਟੀਨ G ਰਾਲ ਨਾਲ ਸ਼ੁੱਧ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਐਂਟੀ-ਹਿਊਮਨ ਐਫਸੀ ਅਤੇ ਐਂਟੀ-SADS-CoV ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਨਾਲ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਬਰਕਰਾਰ ਰੱਖਦਾ ਹੈ।ਫਿਰ S-Fc ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਅਸਿੱਧੇ ELISA (S-iELISA) ਨੂੰ ਵਿਕਸਤ ਕਰਨ ਅਤੇ S-iELISA ਦੀਆਂ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਸਥਿਤੀਆਂ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ, 40 SADS-CoV ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਸੀਰਾ ਦੇ OD450nm ਮੁੱਲ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਦੁਆਰਾ ਇਮਿਊਨੋਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਅਸੇ (IFA) ਅਤੇ ਪੱਛਮੀ ਬਲੋਟਿੰਗ ਦੁਆਰਾ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕੀਤੀ ਗਈ, ਕੱਟ-ਆਫ ਮੁੱਲ ਨੂੰ 0.3711 ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।S-iELISA ਦੀਆਂ ਦੌੜਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ ਅਤੇ ਵਿਚਕਾਰ 6 SADS-CoV ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਸੀਰਾ ਦੇ ਪਰਿਵਰਤਨ ਗੁਣਾਂਕ (CV) ਸਾਰੇ 10% ਤੋਂ ਘੱਟ ਸਨ।ਕਰਾਸ-ਰੀਐਕਟੀਵਿਟੀ ਟੈਸਟ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ S-iELISA ਦਾ ਦੂਜੇ ਪੋਰਸਾਈਨ ਵਾਇਰਸ ਸੀਰਾ ਨਾਲ ਕੋਈ ਕਰਾਸ-ਰੀਐਕਟੀਵਿਟੀ ਨਹੀਂ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, 111 ਕਲੀਨਿਕਲ ਸੀਰਮ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਖੋਜ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ, IFA ਅਤੇ S-iELISA ਦੀ ਸਮੁੱਚੀ ਸੰਜੋਗ ਦਰ 97.3% ਸੀ।ਸੀਰਮ ਦੇ 7 ਵੱਖ-ਵੱਖ OD450nm ਮੁੱਲਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਵਾਇਰਸ ਨਿਊਟ੍ਰਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਟੈਸਟ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ S-iELISA ਦੁਆਰਾ ਖੋਜਿਆ ਗਿਆ OD450nm ਮੁੱਲ ਵਾਇਰਸ ਨਿਊਟ੍ਰਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਟੈਸਟ ਨਾਲ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸਬੰਧਿਤ ਸੀ।ਅੰਤ ਵਿੱਚ, S-iELISA 300 ਸੂਰ ਫਾਰਮ ਸੀਰਮ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ 'ਤੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਹੋਰ ਪੋਰਸੀਨ ਐਂਟਰੋਵਾਇਰਸ ਦੀਆਂ ਵਪਾਰਕ ਕਿੱਟਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ SADS-CoV, TGEV, PDCoV ਅਤੇ PEDV ਦੀਆਂ IgG ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਦਰਾਂ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 81.7%, 54%, ਅਤੇ 65.3% ਸਨ।, 6%, ਕ੍ਰਮਵਾਰ.ਨਤੀਜੇ ਦਿਖਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ S-iELISA ਖਾਸ, ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਜਨਨਯੋਗ ਹੈ, ਅਤੇ ਸੂਰ ਉਦਯੋਗ ਵਿੱਚ SADS-CoV ਲਾਗ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਹ ਲੇਖ ਕਾਪੀਰਾਈਟ ਦੁਆਰਾ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਹੈ।ਸਾਰੇ ਹੱਕ ਰਾਖਵੇਂ ਹਨ.